Preparação de ervas (bromelina, papaína, cúrcuma, pimenta preta) melhora a mineralização e reduz a osteoporose induzida por glicocorticóides em peixes-zebra

(UMA) Coloração histoquímica para atividade TRAP nas escalas PN, CHP e PN + CHP. Um sinal TRAP-positivo foi fortemente detectado ao longo da borda da escama dos peixes tratados com PN, circundando uma área de reabsorção óssea. (B) Uma quantificação de escamas TRAP-positivas indicou que 75% das escamas tratadas com PN foram reabsorvidas em comparação com 25% após o co-tratamento PN + CHP (CTR vs. PN, ***, p <, 0,001; CTR vs. PN + CHP, ***, p < 0,001; PN vs. PN + CHP, ***, p < 0,001). (C) A atividade TRAP, medida por ensaio bioquímico e normalizada para a área de escamas, confirmou alta atividade de reabsorção em escamas tratadas com PN, posteriormente neutralizada por tratamento com CHP (CTR vs. CHP, ** p < 0,01; CTR vs. PN, ***, p < 0,001; CTR vs. PN + CHP, *, p < 0,05; CHP vs. PN, ***, p < 0,001; CHP vs. PN + CHP, *, p < 0,05; PN vs. PN + CHP, *, p < 0,05). (D) Ensaio histológico da atividade de ALP realizado em escalas individuais. As escamas dos peixes tratados com PN mostraram grandes áreas sem atividade de ALP (setas pretas), enquanto as escamas dos peixes tratados com PN + CHP restauraram parcialmente a atividade de ALP se comparadas com CTR e CHP isoladamente. (E) Ensaio bioquímico da atividade ALP. A atividade de ALP nas escamas dos peixes tratados com prednisolona (PN) foi significativamente menor do que o controle não tratado (CTR) (PN vs. CTR, p < 0,05) e CHP sozinho (CHP vs. PN, p < 0,05), enquanto a adição de CHP (PN + CHP) restaurou parcialmente a atividade de ALP (PN + CHP vs. PN, p < 0,05). (F) A análise morfológica com calceína mostrou áreas muito grandes de reabsorção nas escamas tratadas com PN (PN), enquanto elas pareciam drasticamente reduzidas após o tratamento com CHP (PN + CHP). Nenhuma borda reabsorvida pode ser detectada em controles negativos (CTR e CHP sozinhos). (G) A dupla coloração de alizarina-calceína revelou a presença de nova deposição de matriz mineralizada apenas em escamas tratadas com CHP (PN + CHP), em relação aos controles não tratados (PN). Nenhuma área reabsorvida pode ser detectada em controles negativos (CTR e CHP sozinhos).