[Construction of transgenic mice with Δ15 Des enzyme activity by using a PiggyBac transposon]

Os ácidos graxos essenciais são aqueles que não podem ser sintetizados pelo próprio corpo, mas são cruciais para a saúde e a vida. Estudos mostraram que os ácidos graxos ω-3 podem facilitar as funções fisiológicas humanas. Os mamíferos não possuem o gene ω-3 dessaturase, e a Δ15 ácido graxo dessaturase (Δ15 Des) de Caenorhabditis elegans pode transformar os ácidos graxos poliinsaturados ω-6 (PUFAs) em ω-3 PUFAs. Camundongos transgênicos expressando atividade da enzima Δ15Des foram construídos usando um transposon PiggyBac (PB). Camundongos transgênicos homozigotos com herança estável foram criados em pouco tempo, com uma taxa positiva de 35,1% alcançada. Os camundongos foram alimentados com 6% de PUFAs ω-6 e as alterações de ácidos graxos em camundongos foram detectadas por cromatografia gasosa (GC). O nível de expressão de Δ15 Des em camundongos foi detectado por PCR quantitativa (qPCR) e Western blotting (WB). A análise de qPCR e GC revelou que a porcentagem de camundongos positivos que abrigam o gene ativo foi de 61,53%. Em comparação com os métodos tradicionais, a eficiência de transformação e a atividade de Δ15 Des foram significativamente melhoradas, e os homozigotos mostraram maior atividade do que os heterozigotos. Isso verificou ainda mais a eficiência de transdução eficiente do sistema de transposon PiggyBac.