Avaliação de diferentes procedimentos de processamento de amostra aplicados à determinação de melatonina em plantas

Introdução: A melatonina, uma indolamina bem conhecida em vertebrados e estruturalmente relacionada a outras substâncias importantes como o triptofano ou o ácido indol-3-acético, também está presente no reino vegetal, embora sua (s) função (ões) específica (s) ainda não tenham sido estabelecidas. O campo emergente de estudos de melatonina em plantas tem progredido muito lentamente, principalmente devido aos problemas associados à quantificação de melatonina em plantas.

Objetivo: Dois procedimentos comumente usados ​​para amostras de plantas são comparados. As características analíticas de ambos os procedimentos são apresentadas quantitativamente usando diferentes solventes e pequenas quantidades de material biológico fresco, e as respectivas taxas de recuperação e limites quantitativos são apresentados. Algumas melhorias são sugeridas.

Metodologia: Dois procedimentos diferentes de extração de amostra foram comparados: uma extração direta de amostra (DSE) e uma extração de amostra homogeneizada (HSE). A melatonina foi então determinada nas respectivas amostras de plantas por HPLC com detecção por fluorescência.

Resultados: Usando o procedimento DSE, mais de 94% de melatonina foi recuperada das soluções padrão, enquanto níveis superiores a 93% foram recuperados das amostras de plantas enriquecidas, com pouca diferença entre as extrações de acetato de etila e clorofórmio. No caso do HSE, as recuperações de melatonina foram aproximadamente a metade e nunca superiores a 55%. O tratamento ultrassônico proposto no procedimento DSE apresentou diferentes níveis de eficiência (2-20%), dependendo da amostra.

Conclusão: Este estudo estabeleceu que, com o procedimento de extração direta da amostra, maiores taxas de recuperação são obtidas tanto em soluções padrão quanto em amostras de plantas. A simplicidade e reprodutibilidade do procedimento de extração são acompanhadas pela alta sensibilidade obtida com a detecção de fluorescência.