Radioimunoensaios para melatonina usando um anti-soro criado contra um novo antígeno

O anti-soro altamente específico para melatonina (MT) foi produzido, e a sensibilidade e especificidade dos radioimunoensaios (RIAs) usando este anti-soro foi investigada. Um imunógeno foi sintetizado ligando 6-hidroximelatonina (6-OH-MT) à albumina de soro bovino com um espaçador de éster etílico do ácido 6-bromohexanóico. Coelhos foram imunizados por via subcutânea uma vez por mês com 1,0 mg do imunógeno durante 7 meses. O anti-soro foi caracterizado por um teste de reatividade cruzada por RIA usando MT marcado com 125I. O anti-soro reconheceu especificamente a MT, mas dificilmente outros análogos, exceto para 6-OH-MT, com uma reatividade cruzada de apenas 0,4%. Dois RIAs foram estabelecidos usando [o-methyl-3H]MT e 2-[125I]iodo MT. Em ambos os RIAs, as curvas de inibição para MT foram obtidas na faixa de 10 pg a 10 ng e 1-2 ng de MT inibiram o valor do ensaio em “0” pela metade. A semelhança dos RIAs em sensibilidade e inibição por MT não marcada é discutida com base nas estruturas de MTs radioativos e do imunógeno.