Perfil comparativo de fotoafinidade de sondas lipídicas de sinalização de ômega-3 revela prostaglandina redutase 1 como um centro metabólico em macrófagos humanos

O ácido docosahexaenóico constituinte do óleo de peixe (DHA, 22:6 n-3) é um lipídio sinalizador com propriedades anti-inflamatórias. Os mecanismos moleculares subjacentes ao efeito biológico do DHA são pouco compreendidos. Aqui, relatamos o projeto, síntese e aplicação de um par complementar de bio-ortogonais, sondas fotorreativas baseadas no andaime poliinsaturado DHA e seu metabólito oxidativo ácido 17-hidroxidocosahexaenóico (17-HDHA). Nessas sondas, um alcino serve como um identificador para introduzir um grupo repórter fluorescente ou uma marca de afinidade de biotina via cicloadição de azida-alcino catalisada por cobre(I). Este par de sondas químicas foi usado para mapear alvos específicos dos lipídios de sinalização ômega-3 em macrófagos humanos primários. A prostaglandina redutase 1 (PTGR1) foi identificada como um parceiro de interação que metaboliza o 17-oxo-DHA, um metabólito oxidativo do 17-HDHA. O 17-oxo-DHA reduziu a formação dos lipídios pró-inflamatórios 5-HETE e LTB4 em macrófagos e neutrófilos humanos. Nossos resultados demonstram o potencial do perfil comparativo de proteínas de fotoafinidade para a descoberta de enzimas metabólicas de lipídios bioativos e destacam o poder da proteômica química para revelar novos insights biológicos.