Os epóxidos de ácidos graxos ômega-3 produzidos por PAF-AH2 em mastócitos regulam o remodelamento vascular pulmonar
a Número relativo de fibroblastos pulmonares estimulados por extratos lipídicos de meio de cultura de BMMCs quando tratados com ou sem epóxidos ω-3 (1 μM) por 48 h (n= 4). Os dados são representativos de 2 réplicas experimentais independentes. b Número relativo de fibroblastos pulmonares tratados com veículo, 17,18-EpETE (1 μM), 17,18-diHETE (1 μM), 19,20-EpDPE (1 μM), 19,20-diHDoPE (1 μM), EPA (1 μM), ou DHA (1 μM) por 48 h (n = 4). Os dados são representativos de 3 réplicas experimentais independentes. c Níveis de expressão relativa de Col1a1, Acta2 e il6 mRNA em fibroblastos pulmonares tratados com veículo, 17,18-EpETE (1 μM), ou 19,20-EpDPE (1 μM) por 6 h quando estimulados com ou sem TGF-β (2,5 ng/ml) (n = 4). Os níveis de expressão foram normalizados para os do RNA ribossômico 18S e depois para os dos fibroblastos de controle não estimulados. Os dados são representativos de 3 réplicas experimentais independentes. d Imunocoloração de SM22α em fibroblastos pulmonares tratados com veículo, 17,18-EpETE (1 μM), 19,20-EpDPE (1 μM), EPA (1 μM) ou DHA (1 μM) por 24 h quando estimulado com ou sem TGF-β (2,5 ng/ml) (esquerda). Barra de escala, 50μm. Proporção de células SM22α-positivas para fibroblastos pulmonares totais (à direita) (n= 4). Os dados são representativos de 2 réplicas experimentais independentes. e Western blotting de pSmad2, Smad2 e β-Actina em extratos de proteínas totais de fibroblastos pulmonares quando administrado veículo, 17,18-EpETE (1 μM) ou 19,20-EpDPE (1 μM) com ou sem estimulação de TGF-β ( 1 ng/ml e 2,5 ng/ml) por 15 min (esquerda) e quantificação por densitometria (direita). Os experimentos foram repetidos três vezes e os dados foram agrupados. Os dados são média ± SEM. Pos valores foram determinados por ANOVA de uma via com teste de Dunnett post hocteste (a–d) ou ANOVA de duas vias com Tukey post hocteste (e).
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