Efeitos da temperatura em 2-[125I]-iodomelatonina ligação aos receptores de melatonina na retina neural da rã Rana perezi

O presente estudo analisa o efeito das modificações dependentes da temperatura na ligação do análogo 2-[125I]-melatonina para receptores de melatonina em membranas de retina neural isoladas da rã-verde Rana perezi. As constantes de taxa de associação e dissociação (K + 1, K-1) aumentaram exponencialmente com a temperatura do ensaio. A 15 graus C, a associação e dissociação requeriam várias horas; enquanto isso, a 35 graus C, as constantes de taxa eram 100 e 34 vezes mais rápidas, respectivamente. No entanto, a constante Kd calculada como K-1 / K + 1 não foi modificada pela temperatura do ensaio. Quando as rãs foram aclimatadas a 5 ou 22 graus C por 1 mês, as constantes de K + 1 e K-1 determinadas a 15 e 25 graus C eram idênticas nos grupos aclimatados a frio e a quente. Assim, a cinética de ligação dos receptores de melatonina em retinas de rã não mostrou qualquer compensação térmica. Os resultados das curvas de saturação e perfis farmacológicos dos locais de ligação da melatonina suportam a falta de efeito da temperatura do ensaio sobre a afinidade dos receptores de melatonina na retina da rã. A inibição de [125I]A ligação do Mel por GTPgammaS mostrou claramente que o acoplamento dos receptores de melatonina às proteínas G é dependente da temperatura. Concentrações mais altas do análogo de GTP foram necessárias para inibir a ligação específica quando a temperatura diminuiu. O efeito da temperatura na cinética de ligação e no acoplamento da proteína G aos receptores de melatonina sugere que o sinal da melatonina pode ser transduzido distintamente dependendo da temperatura. Assim, a temperatura desempenha um papel importante, não apenas na síntese da melatonina, mas também na transdução do sinal da melatonina em ectotérmicos.