A inibição da enzima cPLA 2 α atenua a inflamação e a proliferação de queratinócitos

AVX001 inibiu a proliferação em monocamadas HaCaT. (UMA) A viabilidade celular foi medida usando o ensaio de resazurina em HaCaT proliferante tratado com AVX001 por 24 h nas concentrações indicadas. As medições foram normalizadas para o controle tratado com veículo, e a média ± SEM para três repetições é mostrada. (B) Microscopia automatizada e análise de DNA marcado com fluorescência, EdU incorporado e atividade da caspase-3/7 foram usadas para quantificar (eu) número do celular, (ii) distribuição do ciclo celular e (iii) apoptose em HaCaT proliferante tratado com AVX001 por 24 h nas concentrações indicadas. Os dados são a média ± SEM para ≥4 réplicas. (C) (eu) A proporção de células na fase S do ciclo celular (índice de proliferação) foi determinada pela contagem dos núcleos totais e positivos para EdU em HaCaT proliferante pré-incubado com veículo ou AVX001 e estimulado com EGF (30 ng / mL, 24 h ) Os dados são a média ± SEM para três repetições de um experimento representativo, repetido duas vezes. (ii) Imagens representativas mostrando 4 ′, 6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) núcleos corados (DAPI) e EdU marcado com fluorescência (EdU) para HaCaT não estimulado (controle) e HaCaT estimulado com EGF (30 ng / mL, 24 h ) na ausência (+ EGF) ou presença de 7 µM AVX001 (AVX001 + EGF). (D) A expressão relativa de ciclina D1 medida por PCR quantitativo em HaCaT proliferante pré-tratado com AVX001 e estimulado com EGF (30 ng / mL, 4h). Os dados foram normalizados para o controle não estimulado (controle) e são a média ± SEM de seis repetições. A significância estatística foi calculada por ANOVA de uma via com pós-análise de Dunnett ou, para dados normalizados, o teste de Kruskal-Wallis com pós-análise de Dunn; # p <0,05, ## p <0,01 ou ### p <0,005 versus controle não estimulado e * p <0,05, ** p <0,01, *** p <0,005 versus controle tratado com veículo.