Quantificação de melatonina em organismos fototróficos

A melatonina, o principal produto secretor da glândula pineal dos vertebrados, também é conhecida por ocorrer em vários organismos fotoautotróficos. Suspeita-se que a indolamina atue como um transdutor de informação fotoperiódica e / ou participe da proteção antioxidativa. Em plantas superiores e outros organismos fotoautotróficos, resultados contraditórios para o conteúdo de melatonina para amostras da mesma espécie mostram que é necessário melhorar ainda mais os métodos para quantificação confiável. No presente estudo, a melatonina foi quantificada em tomate, gengibre e macroalga verde marinha, Ulva lactuca, após extração com três diferentes métodos de extração à base de éter, acetona ou ácido perclórico. A melatonina foi determinada por ensaio imunoenzimático (ELISA) em extratos purificados por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). O mesmo sistema de HPLC utilizado para purificação de extratos foi utilizado para quantificações paralelas após derivatização da melatonina em condições alcalinas na presença de peróxido de hidrogênio (HPLC-PD). Ambos os métodos de quantificação deram resultados semelhantes com uma alta correlação [f(x) = 0.99x + 3.01; R(2) = 0.99]. No gengibre, a concentração de melatonina estava abaixo de 5 pg / g (peso fresco, fw), enquanto nos tomates foram encontrados cerca de 1200 pg / g (fw), e na alga verde, U. lactuca, aproximadamente 12 pg / g (fw) ) Levando em consideração as taxas de recuperação para a melatonina sintética adicionada antes da extração, nenhuma diferença substancial foi observada na quantificação de melatonina entre os diferentes métodos de extração. Os métodos demonstrados com base na purificação por HPLC e subsequente quantificação por ELISA e HPLC-PD permitem determinações de melatonina altamente sensíveis em diversos organismos fotoautotróficos com um baixo risco de superestimação por resultados falso-positivos.