Envolvimento de ROS na morte celular autofágica induzida por curcumina

Muitos agentes anticâncer, bem como radiação ionizante, mostraram induzir autofagia, que é originalmente descrita como um processo de reciclagem de proteínas e recentemente relatado como desempenhando um papel crucial em vários distúrbios. Em células de câncer de cólon humano HCT116, descobrimos que a curcumina, um fitoquímico polifenólico extraído da planta Curcuma longa, induziu marcadamente a conversão da cadeia leve 3 (LC3) -I da proteína 1 associada ao microtúbulo em LC3-II e degradação do sequestoma-1 (SQSTM1) que é um marcador de degradação do autofagossomo. Além disso, descobrimos que a curcumina causou pontos de formação de GFP-LC3, um marcador de autofagossomo, e diminuição do nível de proteína GFP-LC3 e SQSTM1 em células HCT116 que expressam GFP-LC3. Foi ainda confirmado que o tratamento de células com peróxido de hidrogênio induziu aumento da conversão de LC3 e diminuição dos níveis de GFP-LC3 e SQSTM1, mas essas alterações pela curcumina foram quase completamente bloqueadas na presença do antioxidante, N-acetilcisteína (NAC), indicando que a curcumina leva à produção de espécies reativas de oxigênio (ROS), que resulta no desenvolvimento de autofagossomos e degradação autolisossômica. Em paralelo com NAC, a degradação de SQSTM1 também foi diminuída pela bafilomicina A, um potente inibidor da fusão autofagossomo-lisossoma, e o ensaio de viabilidade celular foi ainda confirmado que a morte celular induzida por cucurmina foi parcialmente bloqueada por bafilomicina A, bem como NAC. Observamos também que o NAC aboliu a ativação induzida pela curcumina de quinases extracelulares reguladas por sinal (ERK) 1/2 e proteína quinases ativadas por mitogênio p38 (MAPK), mas não a quinase N-terminal de Jun (JNK). No entanto, a ativação de ERK1 / 2 e p38 MAPK parecia não ter efeito sobre a autofagia induzida por curcumina, uma vez que a conversão da proteína LC3 e a degradação de SQSTM1 pela curcumina não foram alteradas na presença de NAC. Tomados em conjunto, nossos dados sugerem que a curcumina induziu a produção de ROS, que resultou em ativação autofágica e morte celular concomitante em células de câncer de cólon humano HCT116. No entanto, a ativação dependente de ROS de ERK1 / 2 e p38 MAPK, mas não de JNK, pode não estar envolvida na autofagia induzida por curcumina.