Ensaio imunoenzimático direto e um radioimunoensaio para melatonina comparados

Um novo ELISA disponível comercialmente para medição direta da concentração de melatonina no soro foi avaliado e comparado com um RIA usado rotineiramente em nosso laboratório. O ELISA direto é tecnicamente mais simples, requer um volume de amostra menor (0,1 mL) e se compara bem ao RIA em termos de estabilidade da curva de calibração e CVs intra e interensaio. A correlação com as medições de RIA é, no entanto, subótima (y = 0,39x + 56; r = 0,65, P <0,001; n = 138), o que pode ser devido a um efeito sérico, conforme evidenciado por estudos de diluição. Além disso, a faixa de detecção do ELISA não cobre as concentrações fisiológicas de melatonina diurna em humanos. A adição de uma etapa de extração e concentração de 10 vezes mudou o intervalo de detecção do ELISA para incluir também baixas concentrações fisiológicas. A correlação com as medições de RIA também melhorou significativamente (y = 0,97x-23; r = 0,95, P <0,001; n = 105), provavelmente devido à remoção do efeito sérico. Embora a extração aumente o volume de amostra necessário (1,5 mL), a carga de trabalho e o tempo do procedimento, esta etapa é necessária para o ELISA competir com sucesso com o RIA.