Efeitos da curcumina na glicoproteína-P em culturas primárias de hepatócitos de rato

A curcumina é um composto fenólico natural encontrado nos rizomas da Curcuma longa e dotado de atividades biológicas benéficas, incluindo efeitos antioxidantes, anticarcinogênicos e hepatoprotetores. Neste estudo a curcumina foi testada quanto à sua capacidade potencial de interagir in vitro com a glicoproteína P hepática (Pgp), em um sistema modelo representado por culturas primárias de hepatócitos de rato, em que ocorre a superexpressão espontânea de genes de resistência a múltiplas drogas (mdr). Em ambos os hepatócitos recém-plaqueados, contendo baixos níveis de Pgp, e hepatócitos cultivados em 72 horas, contendo altos níveis de Pgp, o efluxo de Rodamina-123 (R-123), que representa um teste funcional específico para o transporte mediado por Pgp, foi inibido pela curcumina de uma forma dependente da dose. A análise de Western blot mostrou que a curcumina 25microM, quando incluída no meio de cultura ao longo da observação experimental (72 horas), foi capaz de diminuir significativamente o aumento da proteína imunorreativa mAb C219 que ocorre espontaneamente nas células durante a cultura. A curcumina, em doses variando de 50 a 150microM foi citotóxica para hepatócitos recém-plaqueados, como mostrado pela forte diminuição na capacidade da célula de excluir o azul de tripan 24 horas depois, mas foi significativamente menos citotóxico quando adicionado a uma cultura de 24 ou 48 horas células. A resistência à curcumina, adquirida progressivamente pelas células durante a cultura, foi significativamente reduzida por altas concentrações de dexametasona (DEX) ou dimetilsulfóxido (DMSO), condições de cultura conhecidas por inibirem a superexpressão espontânea de Pgp. Além disso, de maneira dependente da concentração, o verapamil reverteu a resistência à curcumina em hepatócitos com superexpressão de Pgp. Em estudos de rotulagem de fotoafinidade, a curcumina competiu com a azidopina pela ligação à Pgp, sugerindo uma interação direta com a glicoproteína. Esses resultados sugerem que a curcumina é capaz de modular tanto a expressão quanto a função da Pgp hepática in vitro e sustentam a hipótese de que a curcumina, um fitoquímico quimiopreventivo, poderia se revelar também como um composto dotado de propriedades quimiossensibilizantes no fenótipo mdr.