Determinação de melatonina na saliva usando extração automatizada em fase sólida, cromatografia líquida de alto desempenho e detecção de fluorescência

Um método bioanalítico sensível para a determinação de melatonina na saliva por extração em fase sólida (SPE), cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e detecção de fluorescência foi desenvolvido e validado. A saliva foi coletada com um dispositivo de amostragem Salivette (Sarstedt) e uma coluna SPE de modo misto foi usada para a extração de melatonina e padrão interno (N-acetil-6-metoxitriptamina) da saliva. A separação cromatográfica foi realizada usando uma coluna HyPurity C18 LC (150 x 2,1 mm) com tampão de acetonitrila-amônio hidrogenocarbonato de fase móvel, 0,015 M, pH 6,8 (23:77, v / v). Os comprimentos de onda de excitação e emissão foram fixados em 285 nm e 345 nm, respectivamente. A precisão dentro do dia para o método a 50 pmol / L foi de 7,9% e a precisão entre os dias foi de 10,5%. O limite de quantificação foi de 50 pmol / L.