Caracterização, modulação da guanosina 5′-O- (3-tiotrifosfato), variação diária e localização dos locais de ligação da melatonina no cérebro do peixe-gato (Silurus asotus)

Características, modulação de guanosina 5′-O- (3-tiotrifosfato) (GTPgammaS), variação diária e localização de sítios de ligação de melatonina no cérebro de um teleósteo noturno, o bagre Silurus asotus, foram estudados por ensaio de radioreceptor usando 2-[125I]iodomelatonina como radioligando. A ligação específica foi rápida, estável, saturável e reversível. O radioligando se liga a uma única classe de sítio receptor com uma afinidade (Kd) de 30,7 +/- 7,3 pM e capacidade de ligação total (Bmax) de 9,76 +/- 0,79 fmol / mg de proteína (média +/- SE, n = 5 ) Os locais de ligação eram altamente específicos para 2-iodomelatonina e melatonina. A especificidade foi quase idêntica à dos receptores de melatonina funcionais nos melanóforos dérmicos e epidérmicos desta espécie e dos receptores de melatonina do subtipo ML-1 em vertebrados, incluindo os locais de ligação da melatonina no cérebro do peixe dourado. O tratamento com GTPgammaS alterou os valores de Kd e Bmax, indicando que os locais de ligação da melatonina no cérebro do peixe-gato estão acoplados à proteína G. Os valores de Bmax não exibiram variação diária sob ciclos claro-escuro de 12 horas de luz: 12 horas de escuridão, enquanto os níveis de melatonina no plasma e Kd flutuaram de forma rítmica. A densidade dos locais de ligação da melatonina em áreas discretas do cérebro foi determinada como sendo mais alta no tectum-tálamo e hipotálamo ópticos, intermediária no telencéfalo, cerebelo e medula oblonga e mais baixa nos bulbos olfatórios. Estes resultados sugerem que a melatonina secretada do órgão pineal e / ou retina desempenha papéis neuromoduladores no cérebro do bagre por meio de receptores de melatonina acoplados à proteína G. As características dos receptores de melatonina parecem ser altamente conservadas durante a evolução, embora a densidade dos receptores de melatonina não seja regulada pela própria melatonina nesta espécie.