Ácidos graxos de óleo de peixe e plaquetas humanas: diminuição dependente da dose em dienóico e aumento na geração de tromboxano trienóico

O enriquecimento dietético de fosfolipídios de membrana com ácidos graxos n-3 (derivados de óleo de peixe) atraiu a atenção como um regime terapêutico putativo para a supressão de eventos inflamatórios e coagulatórios. O uso de infusões lipídicas enriquecidas com ácido graxo n-3 para nutrição parenteral resulta em concentrações micromolares de ácido eicosapentaenóico (EPA) e ácido docosahexaenóico (DCHA) na fração de ácido graxo livre de plasma. Nós investigamos a influência de EPA e DCHA livres na formação de tromboxano (Tx) A2 e A3 de plaquetas usando uma técnica de cromatografia líquida de alta performance-ELISA desenvolvida recentemente para quantificação separada dos produtos de hidrólise estáveis ​​TxB2 e TxB3. Trombócitos humanos lavados foram incubados com ácido araquidônico livre (AA; 1 microM), A23187 (0,1 microM) ou trombina (5 U / mL) para estimulação; todos os regimes provocaram grandes quantidades de TxA2 na ausência de TxA3. A mistura simultânea de EPA livre ou DCHA livre ao meio de incubação (faixa de concentração de 0,01-50 microM) suprimiu amplamente a geração de TxA2 de plaquetas em resposta a todos os estímulos usados ​​de uma maneira dependente da dose. A concentração efetiva com 50% de influência de ácido araquidônico foi de 4,2 microM, enquanto a concentração inibitória com 50% de efeito de EPA e DCHA foram ambas na mesma ordem de magnitude, mas diferiram com a natureza do agonista (0,2-7 microM). A (co-) incubação de plaquetas com EPA, mas não DCHA, provocou a síntese dependente da dose de tromboxano derivado de n-3-lipídios: a cinética de formação e as quantidades absolutas de TxA3 aproximaram-se de 20% dos respectivos dados de TxA2 após estimulação com AA. Tanto o EPA quanto o DCHA suprimiram a agregação plaquetária provocada pelo U46619 de maneira dependente da dose. Concluímos que EPA e DCHA são inibidores competitivos potentes da geração de TxA2 por plaquetas intactas, com EPA atuando como substrato pobre e DCHA sendo nenhum substrato para o complexo ciclooxigenase / tromboxano sintase. O enriquecimento da fração de ácido graxo livre de plasma com n-3 lipídios pode oferecer um regime terapêutico para suprimir a síntese do potente agente pró-agregador e vasoconstritor TxA2.