A Curcuma Longa Induz o Fator de Transcrição FOXP3 a Diminuir a Expressão da Quimiocina Humana CCR5 e Inibir a Infecção pelo HIV-1

As mutações do HIV ocorrem com frequência, apesar do sucesso substancial da terapia antirretroviral combinada, que prejudica significativamente a progressão do HIV. A falha no desenvolvimento de vacinas específicas, a ocorrência de cepas resistentes a medicamentos e a alta incidência de efeitos adversos devido a regimes de terapia antiviral combinada exigem antivirais novos e mais seguros. Os produtos naturais são uma importante fonte de novos agentes anti-infecciosos. Por exemplo, a curcumina inibe o HIV e a inflamação em ensaios de cultura celular. A curcumina, principal constituinte dos rizomas secos de Cúrcuma é longa L. (açafrão), é conhecido como um forte agente antioxidante e anti-inflamatório com diferentes efeitos farmacológicos. Este trabalho tem como objetivo avaliar os efeitos inibitórios da curcumina sobre o HIV em vitro e explorar o mecanismo subjacente, com foco no CCR5 e na proteína P3 do fator de transcrição forkhead box (FOXP3). Primeiro, a curcumina e o inibidor de RT zidovudina (AZT) foram avaliados quanto às suas propriedades inibitórias. A infecciosidade do pseudovírus HIV-1 foi determinada por fluorescência verde e medições da atividade da luciferase em células HEK293T. O AZT foi usado como controle positivo que inibiu os pseudovírus HIV-1 dose-dependente, com valores de IC50 na faixa nanomolar. Em seguida, uma análise de docking molecular foi realizada para avaliar as afinidades de ligação da curcumina para CCR5 e HIV-1 RNase H/RT. O ensaio de atividade anti-HIV mostrou que a curcumina inibiu a infecção por HIV-1, e a análise de docking molecular revelou constantes de dissociação de equilíbrio de [Formula: see text]9.8[Formula: see text]kcal/mol e [Formula: see text]9.3[Formula: see text]kcal/mol entre curcumina e CCR5 e HIV-1 RNase H/RT, respectivamente. Examinar o efeito anti-HIV da curcumina e seu mecanismo em vitro, a citotoxicidade celular, o sequenciamento do transcriptoma e as quantidades de CCR5 e FOXP3 foram avaliadas em diferentes concentrações de curcumina. Além disso, os construtos de deleção do promotor CCR5 humano e o plasmídeo de expressão FOXP3 pRP-FOXP3 (com uma etiqueta EGFP) foram gerados. Foi examinado se a ligação do DNA do FOXP3 ao promotor CCR5 foi atenuada pela curcumina usando ensaios de transfecção empregando construtos do promotor do gene CCR5 truncado, um ensaio de repórter de luciferase e um ensaio de imunoprecipitação de cromatina (ChIP). Além disso, concentrações micromolares de curcumina inativaram o fator de transcrição nuclear FOXP3, o que resultou na diminuição da expressão de CCR5 em células Jurkat. Além disso, a curcumina inibiu a ativação de PI3K-AKT e seu alvo a jusante FOXP3. Esses achados fornecem evidências mecanísticas que encorajam uma avaliação mais aprofundada da curcumina como um agente dietético usado para reduzir a virulência do HIV-1 CCR5-trópico. A degradação de FOXP3 mediada pela curcumina também foi refletida em suas funções, a saber, transativação do promotor CCR5 e produção de virion HIV-1. Além disso, a inibição da curcumina de CCR5 e HIV-1 pode constituir uma estratégia terapêutica potencial para reduzir a progressão do HIV.