Um método de espectrometria de massa em tandem de cromatografia líquida para medir ácidos graxos em amostras biológicas

À medida que aumenta o interesse da pesquisa pré-clínica e clínica em ácidos graxos poliinsaturados (PUFA) ω-3, aumenta também a necessidade de um método analítico rápido, preciso e reprodutível para medir ácidos graxos (AF) em amostras biológicas, a fim de validar o prognóstico potencial biomarcadores preditivos, bem como estabelecer conformidade em ensaios de intervenção ω-3 PUFA Desenvolvemos um método LC-ESI-MS / MS adequado para desenvolvimento de alto rendimento para medir FAs e o validamos no contexto de tratamento com ácido eicosapentaenóico ω-3 PUFA (EPA). Com exclusividade, comparamos diretamente o método LC-ESI-MS / MS com um protocolo GC-MS. Demonstramos que o método LC-ESI-MS / MS é preciso e reprodutível, com coeficientes de variação consistentemente abaixo de 15% para cada PUFA analisado. Os valores de conteúdo relativo de FA correlacionaram-se bem com aqueles obtidos por GC-MS (r²= 0,94, p <0,001 para EPA) in vitro. Os dados obtidos após a análise do conteúdo de AF dos tecidos do fígado de camundongos alimentados com uma dieta enriquecida com ácido eicosapentaenóico mostraram resultados semelhantes aos de estudos publicados nos quais GC-MS foi usado. O método LC-ESI-MS / MS permite a análise concomitante de FAs não esterificados (livres, não ligados) e esterificados (ligados) em amostras biológicas, permitindo a investigação de diferentes pools de PUFA em células e tecidos.