Triagem de alto rendimento para identificar inibidores naturais da monoamina oxidase B humana

O aumento relacionado à idade na monoamina oxidase B (MAO-B) pode contribuir para doenças neurodegenerativas do SNC. Além disso, os inibidores da MAO-B são usados ​​no tratamento da doença de Parkinson idiopática como monoterapia preliminar ou terapia adjuvante com L-dopa. Até o momento, fontes naturais escassas de inibidores da MAO-B foram identificadas, e a força relativa, potência e classificação de muitas plantas em relação a drogas padrão como Selegilina (L-deprenil, Eldepril) não são conhecidas. Neste trabalho, desenvolvemos e utilizamos um formato de microarray de enzimas de alto rendimento para triar e avaliar 905 extratos de produtos naturais (0,025-0,7 mg / ml) para inibir a MAO-B humana derivada de células BTI-TN-5B1-4 infectadas com células recombinantes baculovírus. A sequência da proteína da enzima purificada foi confirmada usando espectroscopia de massa em tandem com dessorção a laser com eletroforese em gel 1D assistida por matriz, e a atividade enzimática foi confirmada por [1] conversão de substrato (benzilamina 3 mM) em H202 e [2] benzaldeído. Dos 905 extratos naturais testados, os IC50s mais baixos [<0.07 mg/ml] foram obtidos com extratos de cortiça de Amur (Phellodendron amurense), semente de Bakuchi (Cyamopsis psoralioides), raiz de alcaçuz (Glycyrrhiza glabra / uralensis), Babchi (semente de Psoralea corylifolia). Os dados também mostram, embora em menor grau, propriedades inibidoras de ervas originárias da família da hortelã (Lamiaceae) e cúrcuma, confrei, bringraj, calota craniana, kava-kava, índigo selvagem, genciana e chá verde. Em conclusão, os dados refletem as informações de potência relativa por classificação de ervas e plantas comumente usadas que contêm propriedades inibidoras da MAO-B humana em sua forma natural.