Relógio circadiano em cultura de células: II. Arrasto fótico in vitro de oscilação de melatonina de células pineais dissociadas de galinha

A glândula pineal aviária contém osciladores circadianos que regulam a síntese rítmica da melatonina. Desenvolvemos um sistema de cultura de células de fluxo contínuo para começar a estudar a base celular e molecular deste oscilador circadiano de vertebrado. As culturas de células pineais expressam uma oscilação circadiana da liberação de melatonina por pelo menos 5 ciclos em escuridão constante com um período próximo a 24 horas. Em todos os sistemas circadianos, a luz regula o ritmo pelo processo de arrastamento que envolve o controle da fase e do período do oscilador circadiano. Em culturas de células da pineal de pintinhos, investigamos os efeitos de arrastamento da luz de 2 maneiras: alterando o ciclo claro-escuro in vitro e medindo os efeitos de mudança de fase de pulsos de luz únicos. Um avanço ou atraso de 6 horas de um ciclo de claro-escuro LD 12:12 produziu uma mudança correspondente no ritmo da melatonina. As mudanças de fase dos ritmos persistiram após a transferência para a escuridão constante, mostrando que o oscilador circadiano subjacente foi sincronizado. O arrastamento fótico do oscilador foi ainda caracterizado pela medição dos efeitos de deslocamento de fase de pulsos de luz de 6 horas. Pulsos únicos de luz mudaram a fase do oscilador circadiano de uma maneira dependente de fase. Pulsos de luz começando no início da noite subjetiva atrasaram a fase da oscilação 8 horas em relação aos controles de escuridão. Por outro lado, os pulsos de luz começando no final da noite subjetiva avançaram a fase da oscilação em quase 8 horas. Assim, os fotorreceptores dentro das culturas de células podem mediar o arrastamento dos osciladores pineais. (RESUMO TRUNCADO EM 250 PALAVRAS)