Perfil de ácido graxo livre em extrato de algas marinhas por LC-MS / MS e isolamento, bem como quantificação do ácido graxo ω-3 hexadeca-4,7,10,13-ácido tetraenóico

A alga Undaria pinnatifida (Wakame) contém grandes quantidades de ácido hexadeca-4Z, 7Z, 10Z, 13Z-tetraenóico, que foi relatado como diminuindo a eficiência dos quimioterápicos da cisplatina. Para obter um extrato enriquecido com ácido graxo deste ácido graxo ω-3 poli-insaturado como padrão analítico, Wakame foi utilizado como matéria-prima para sua extração. Um protocolo de extração de duas etapas consistindo em uma extração líquido-líquido seguida por extração em fase sólida com 3-aminopropil sílica de acordo com um modo de eluição de fase normal foi desenvolvido. Uma cromatografia líquida de ultra alto desempenho com método de espectrometria de massa em tandem de ionização por eletrospray com base na aquisição sequencial em janela de todos os espectros de massa de íon de fragmento teórico permitiu um perfil de ácidos graxos seletivos de grupo abrangente simultâneo de maneira não direcionada e análise quantitativa do ácido graxo direcionado. O ácido hexadeca-4Z, 7Z, 10Z, 13Z-tetraenóico foi identificado usando espectros de íons de produto de alta resolução. O método quantitativo foi baseado em ácido hexadeca-4Z, 7Z, 10Z, 13Z-tetraenóico d5-deuterado que foi empregado como calibrador substituto. A validação preliminar do método foi realizada avaliando os limites de detecção e quantificação, faixa linear, intra-ensaio e precisão inter-dias. Finalmente, uma concentração de 421,2 ± 14,9 ng / mL (4% CV) de ácido hexadeca-4Z, 7Z, 10Z, 13Z-tetraenóico foi determinada no extrato que foi posteriormente usado como padrão analítico.