O envelhecimento prejudica as vias de sensibilização ao Ca2 + no músculo liso da vesícula biliar

A sensibilização ao cálcio é um processo fisiológico importante na contração do músculo liso induzida por agonista. Em suma, a sensibilização ao cálcio é uma via que leva à contração do músculo liso, independentemente das mudanças [Ca(2+)](i) por meio da inibição da fosfatase da cadeia leve da miosina. O envelhecimento tem impactos negativos na resposta contrátil da vesícula biliar devido ao comprometimento parcial na sinalização do cálcio e alterações na maquinaria contrátil. No entanto, as informações sobre as alterações induzidas pelo envelhecimento na sensibilização ao cálcio são escassas. Nossa hipótese é que o sistema de sensibilização ao cálcio é afetado negativamente pela idade. Para investigar isso, as vesículas biliares foram coletadas de porquinhos-da-índia adultos (4 meses de idade) e com idade (22-24 meses). Para avaliar a contribuição das vias de sensibilização ao cálcio, testamos o efeito dos inibidores específicos Y-27632 e GF109203X nas contrações isométricas da vesícula biliar “in vitro” induzidas por desafios agonistas. Além disso, a expressão e fosforilação (como índice de ativação) de proteínas que participam das vias de sensibilização ao cálcio foram quantificadas por Western blotting. O envelhecimento reduziu as contrações evocadas por betanecol e colecistoquinina, um efeito associado a uma redução na fosforilação de MLC20 e nos efeitos de Y-27632 e GF109203X. Além disso, houve queda na expressão de ROCK I, ROCK II, MYPT-1 e PKC e na ativação / fosforilação de MYPT-1, PKC e CPI-17 em resposta aos agonistas. Curiosamente, o tratamento com melatonina por 4 semanas restaurou as respostas contráteis da vesícula biliar devido ao restabelecimento das vias de sensibilização ao cálcio. Esses resultados demonstram que a hipocontratilidade da vesícula biliar relacionada à idade está associada a alterações nas vias de sensibilização ao cálcio e que o tratamento com melatonina exerce efeitos benéficos na recuperação da contratilidade da vesícula biliar.