Modelagem molecular do receptor de melatonina MT2 humano: o papel de Val204, Leu272 e Tyr298 na ligação ao ligante

Foi gerado um modelo da parte helicoidal do receptor de melatonina MT2 humano (hMT2), membro da superfamília de receptores acoplados à proteína G, com base na estrutura da rodopsina bovina. A modelagem foi combinada com a mutagênese dirigida ao local para investigar o papel dos resíduos de aminoácidos específicos nos domínios transmembranares (TM) números V, VI e VII do receptor hMT2 na interação com 2-iodomelatonina. Ensaios de ligação de saturação com 2-iodomelatonina demonstraram que a substituição V204A (TMV) resultou na perda total de ligação enquanto a mutação V205A não teve efeito. A substituição de F209 por alanina levou a uma diminuição significativa no valor Bmax de ligação ao receptor, enquanto as mutações V205A e F209A também dentro de TM V não alteraram significativamente as propriedades de ligação do receptor hMT2. No caso de TM VI, a substituição G271T causou diminuição substancial na ligação de 2-iodomelatonina ao receptor hMT2. A alteração L272A (TM VI), bem como a mutação Y298A dentro de TM VII, aboliu completamente a ligação do ligando ao receptor. Estes dados sugerem que vários novos resíduos de aminoácidos dentro de TM V, VI e VII estão envolvidos na interação ligante-receptor MT2.