Ligação específica de 2-[125I]melatonina por membranas parcialmente purificadas de timo de rato

Os locais de ligação da melatonina foram caracterizados em membranas do timo de rato parcialmente purificadas. A ligação específica de 2-[125I]iodomelatonina ([125I]MEL) para as membranas do timo era dependente do tempo e da temperatura, estável, saturável e reversível. Ligação dependente da concentração de [125I]MEL para membranas do timo era saturável e resultou em um gráfico de Scatchard linear, sugerindo ligação a uma única classe de sítios de ligação. O Kd para este único local foi de 0,47 nM com uma capacidade de ligação de 1,01 pM. Em estudos de competição, a ligação específica de [125I]A MEL às membranas do timo foi inibida pelo aumento das concentrações de melatonina nativa. A análise de Scatchard mostrou que, ao contrário dos estudos de saturação com [125I]MEL, os dados eram compatíveis com a existência de duas classes de sítios de ligação: um sítio de alta afinidade com um Kd de 1,72 +/- 0,25 nM e uma capacidade de ligação de 1,40 +/- 0,18 pM, e um sítio de baixa afinidade com um Kd de 1226 +/- 325 nM e uma capacidade de ligação de 460 +/- 87 pM. Curiosamente, os valores de Kd e BC do sítio de ligação de alta afinidade descritos por estudos de competição são semelhantes aos obtidos por estudos de saturação com [125I]MEL. Ligação de [125I]A MEL para as membranas do timo foi específica, conforme indicado pelo fato de nenhum outro precursor ou derivado da melatonina ser tão potente quanto a melatonina na inibição da ligação de [125I]MEL para membranas. Os resultados sugerem fortemente que a melatonina está envolvida na regulação da atividade do timo.