Isolamento de melatonina por cromatografia de imunoafinidade

. 25 de julho de 2002; 775 (1): 9-15.

doi: 10.1016 / s1570-0232 (02) 00246-5.

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Jakub Rolcík et al. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2002.

Resumo

Um método de etapa única, altamente específico e fácil de usar foi desenvolvido para o isolamento e purificação da melatonina de matrizes biológicas complexas. Anticorpos policlonais altamente específicos contra melatonina (com reatividades cruzadas com compostos relacionados abaixo de 0,02%, exceto para 6-hidroximelatonina) foram levantados, caracterizados por ensaio imunoenzimático (ELISA) e usados para preparação de gel de imunoafinidade. A recuperação de melatonina pelo método de imunoafinidade foi de aproximadamente 95%, permitindo o processamento de uma única etapa das amostras antes da análise de HPLC-MS por eletropulverização (com limite de detecção de 10 fmol). O método foi usado com sucesso para determinar a melatonina no soro humano e revelou-se melhor do que a extração em fase sólida não específica publicada anteriormente.

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