Estimando o tempo de deposição de traços com biomarcadores circadianos: uma ferramenta prospectiva e versátil para reconstrução da cena do crime

Vincular amostras biológicas encontradas na cena do crime com o evento real do crime representa o aspecto mais importante da investigação forense, junto com a identificação do doador da amostra. Embora o perfil de DNA esteja bem estabelecido para a identificação do doador, não existem métodos confiáveis ​​para cronometrar as amostras forenses. Aqui, fornecemos pela primeira vez uma abordagem bioquímica para determinar o tempo de deposição de vestígios humanos. Usando ensaios imunoenzimáticos comerciais, mostramos que os perfis de 24 horas característicos de dois hormônios circadianos, melatonina (pico de concentração tarde da noite) e cortisol (pico pela manhã) podem ser reproduzidos a partir de pequenas amostras de sangue total e saliva. Demonstramos ainda, analisando pequenas manchas secas e armazenadas por até 4 semanas, a estabilidade in vitro da melatonina, enquanto para o cortisol foi observada uma deterioração estatisticamente significativa com o tempo de armazenamento, embora o hormônio ainda fosse detectável de forma confiável em amostras de 4 semanas de idade. Finalmente, mostramos que a concentração de proteína total, também avaliada por meio de um ensaio comercial, pode ser usada para normalização de sinais hormonais no sangue, mas nem tanto na saliva. Nossos dados demonstram, portanto, que a estimativa de concentrações normalizadas de melatonina e cortisol representa uma abordagem prospectiva para determinar o tempo de deposição de amostras de traços biológicos, pelo menos de sangue, com expectativas promissoras para aplicações forenses. Em um contexto mais amplo, nosso estudo abre um novo campo de biomarcadores circadianos para o tempo de deposição de vestígios forenses; estudos futuros usando outros biomarcadores circadianos podem revelar se o intervalo de tempo oferecido pelos dois hormônios estudados aqui pode ser especificado com mais exatidão.