Determinação simultânea de atividades enzimáticas e concentrações de substrato na via sintética da melatonina na mesma glândula pineal de rato

Este estudo detalha os procedimentos envolvidos na medição de vários componentes do metabolismo do indol dentro da glândula pineal. Triptofano, 5-hidroxitriptofano, serotonina, N-acetilserotonina, melatonina, ácido 5-hidroxiindolacético, atividade de N-acetiltransferase (NAT) e atividade de hidroxiindol-O-metiltransferase foram medidos por uma combinação de três técnicas, que incluíram microensaios, radioimunoensaio e cromatografia líquida de alta performance. A determinação dos componentes da via sintética da melatonina dentro da mesma glândula reduz o número de animais necessários para estudos e permite o cálculo de correlações entre esses constituintes. Graus muito elevados de correlação (r = 0,91-0,99) são vistos entre aqueles compostos que exibem ritmos significativos (serotonina, atividade de NAT, N-acetilserotonina e melatonina) quando as médias dos grupos são comparadas. Quando as correlações são calculadas por animal ao longo do experimento, graus moderados a altos de correlação (r = 0,57-0,79) são encontrados entre os componentes que exibem ritmos. No entanto, quando as correlações são determinadas por animal em cada ponto de tempo, nenhuma correlação significativa é encontrada. Uma hipótese responsável por essas diferenças pode ser que as mudanças ocorrem no metabolismo do indol dentro da mesma glândula pineal durante um período de alguns minutos.