Determinação espectrofluorimétrica e espectrofotométrica simultânea de melatonina e piridoxina em preparações farmacêuticas por métodos de calibração multivariada

Os métodos de calibração de mínimos quadrados parciais (PLS) e regressão de componentes principais (PCR) foram utilizados para a determinação espectrofluorimétrica e espectrofotométrica simultânea de piridoxina (PY) e melatonina (MT). Uma vez que os espectros de emissão e adsorção dessas drogas se sobrepõem, PY e MT não podem ser determinados diretamente por métodos fluorimétricos ou espectrofotométricos. Os métodos PLS e PCR multivariados de calibração de espectro total foram desenvolvidos para fluorimetria e espectrofotometria. As condições foram otimizadas para determinação fluorimétrica e espectrofotométrica de ambas as drogas. A determinação simultânea de PY e MT foi realizada em misturas registrando o espectro de fluorescência de emissão entre 324 e 500 nm (lambda (ex) 285 nm) para fluorimetria, e registrando o espectro de absorção entre 250 e 350 nm para espectrofotometria (lambda ( max (PY)) 310 nm, lambda (max (MT)) 278 nm). As matrizes experimentais de calibração foram projetadas ortogonalmente. Nas condições ideais, as faixas dinâmicas foram de 0,04-1,3 e 0,1-4 µg ml (-1) para fluorimetria e 1-22 e 1-24 µg ml (-1) para espectrofotometria para MT e PY, respectivamente. As concentrações de calibração foram preparadas nas faixas dinâmicas. Os parâmetros do procedimento quimiométrico para a determinação simultânea de MT e PY foram otimizados, e os métodos propostos foram validados com conjunto de predição. Finalmente, os procedimentos foram aplicados com sucesso na determinação espectrofluorimétrica e espectrofotométrica simultânea de PY e MT em misturas sintéticas e em uma formulação farmacêutica.