Desenvolvimento e caracterização da deficiência de ácidos graxos essenciais em células endoteliais humanas em cultura

Nós induzimos uma deficiência de ácido graxo essencial (EFAD) em células endoteliais da veia umbilical humana por cultura em meio com 20% (vol / vol) de soro fetal de bezerro delipidado. EFAD, refletido pela diminuição do ácido linoléico celular (18: 2 ômega 6) e do ácido araquidônico (20: 4 ômega 6) e emergência do derivado do ácido oleico 5,8,11-ácido eicosatrienóico (20: 3 ômega 9; ácido de Mead) , era evidente após 1 semana de cultura e tornou-se pronunciado após 2 semanas. Além desse ponto de tempo, as células de controle (cultivadas em 20% de soro fetal de bezerro normal) cresceram deficientes de 18: 2 ômega 6 e as células EFAD morreram. A adição de 18: 2 ômega 6 às células EFAD resultou em aumentos dependentes da dose de 18: 2 ômega 6 e 20: 4 ômega 6. 20: 4 ômega 6 ou ácido 5,8,11,14,17-eicosapentaenóico (20: 5 as adições de ômega 3 resultaram na normalização desses ácidos, e a conversão de 20: 5 ômega 3 em ácido 4,7,10,13,16,19-docosahexaenóico (22: 6 ômega 3) foi observada. Aumentos induzidos por agonistas nas concentrações de prostaciclina (prostaglandina I2; PGI2) e Ca2 + citosólico, [Ca2+]i, foram reduzidos nas células EFAD e não restaurados por adições de ômega 6 de 18: 2 ou ômega 6 de 20: 4. A mudança do meio em culturas EFAD 1 dia antes dos experimentos diminuiu 20: 3 ômega 9 e normalizou a produção de PGI2 e [Ca2+]i muda, enquanto a adição de 20: 3 ômega 9 às células de controle prejudicou o [Ca2+]i, indicando um efeito supressor de 20: 3 ômega 9. Assim, EFAD em células endoteliais está associado a anormalidades na produção de eicosanóides e segundo mensageiro, em parte atribuíveis ao acúmulo de 20: 3 ômega 9. Além disso, o surgimento gradual de deficiência de ômega 6 18: 2 em células de controle crescidas regularmente sublinha a necessidade de uma análise cuidadosa de ácidos graxos em culturas de células de longo prazo.