Aplicação de microextração líquido-líquido dispersiva otimizada para determinação de melatonina por HPLC-UV em amostras de plasma
A melatonina (N-acetil-3- (2-aminoetil) -5-metoxiindol) é biologicamente ativa como um neuro-hormônio e agente antioxidante. A microextração líquido-líquido dispersiva otimizada (DLLME) seguida por cromatografia líquida de alta performance-detecção ultravioleta (HPLC-UV) foi usada para a análise de melatonina em plasma humano. Variáveis de influência, como volume de extração (tetracloreto de carbono: CCl4) e solventes de dispersão (acetonitrila: ACN), pH e força iônica, tempo de extração e tempo de centrifugação foram selecionados em um projeto fatorial fracionário 2 (6-2) (FFD) e então as variáveis significativas foram otimizadas usando um projeto composto central (CCD). Em condições ideais, os valores das variáveis foram definidos como pH 6,0, 1,5 mL ACN, 140 μL CCl4, 1,0 min de tempo de extração e 3,0 min de centrifugação a 4.500 rpm. Em condições ideais, o método tem resposta linear acima de 2,0-500,0 ng mL (-1) com limite de detecção de 0,5 ng mL (-1) com desvios padrão relativos (RSDs) inferiores a 5,0%. Os valores de RSD intra e inter-dia foram 4,3% e 8,5%, respectivamente. O método foi aplicado com sucesso para a análise de melatonina em amostra de plasma.
Palavras-chave: Projeto composto central; Microextração líquido-líquido dispersiva; Projeto fatorial fracionário; HPLC; Melatonina; Plasma.
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