A curcumina ativou as vias proteolíticas mediadas por receptor e mediada por mitocôndria para apoptose em células T98G de glioblastoma humano

O efeito terapêutico da curcumina (CCM), um composto polifenólico do rizoma da Curcuma longa, ainda não foi examinado no glioblastoma. Usamos células T98G de glioblastoma humano para explorar a eficácia da CCM para induzir apoptose e identificar mecanismos proteolíticos envolvidos neste processo. O teste de exclusão do corante azul tripano mostrou diminuição na viabilidade celular com o aumento da dose de CCM. A coloração de Wright e o ensaio ApopTag mostraram, respectivamente, características morfológicas e bioquímicas de apoptose em células T98G expostas a 25 microM e 50 microM de CCM por 24 h. O tratamento com via de apoptose mediada por receptor ativado por CCM como Western blotting mostrou ativação de caspase-8 e clivagem de Bid para tBid. Além disso, a CCM causou um aumento na razão Bax: Bcl-2 e liberação mitocondrial de citocromo c, Segundo ativador mitocondrial de caspases / proteína de ligação IAP direta com baixo pI (Smac / Diablo), e fator indutor de apoptose (AIF) indicando envolvimento da via mediada por mitocôndrias também. Regulação negativa do fator nuclear kappa B (NFkappaB), aumento da expressão do inibidor do fator nuclear kappa B alfa (IkappaB alfa) e diminuição da expressão de proteínas inibidoras de apoptose (IAPs), como c-IAP1 e c-IAP2 em As células T98G após o tratamento com CCM sugeriram supressão do sinal de sobrevivência. A ativação da caspase-9 e caspase-3 foi detectada na geração de fragmentos ativos de 35 kD e 20 kD, respectivamente. As atividades da calpaína e da caspase-3 clivaram a alfa-espectrina de 270 kD em locais específicos para gerar o produto de decomposição da espectrina de 145 kD (SBDP) e o SBDP de 120 kD, respectivamente. Nossos resultados sugerem fortemente que a CCM induziu mecanismos proteolíticos mediados por receptor e mitocôndria para indução de apoptose em células T98G.