Um ensaio altamente sensível de melatonina no nível de femotograma em plasma humano por cromatografia gasosa / espectrometria de massa de ionização química de íon negativo

Um ensaio altamente sensível e específico foi desenvolvido para a análise de rotina da melatonina ao nível do femotograma no plasma humano. Melatonina e o padrão interno deuterado [(2H4)melatonin] foram medidos por cromatografia gasosa / espectrometria de massa de ionização química de íon negativo com metano como gás reagente. Um procedimento simples de extração líquido-líquido foi usado para isolar os dois compostos de interesse da matriz biológica complexa. A melatonina foi convertida no derivado fluorado com anidrido pentafluoropropiônico. O espectrômetro de massa foi ajustado para monitorar os íons muito intensos e estáveis ​​em m / z 320 e 323 que foram gerados na fonte de íons por um processo de captura dissociativa. Este ensaio foi realizado com 1 ml de plasma e o limite de quantificação do método foi calculado estatisticamente em 0,5 pg ml-1. Os desvios padrão relativos muito baixos e as porcentagens médias de erro calculadas durante os ensaios de repetibilidade dentro do dia ou entre os dias demonstraram claramente a robustez da técnica para a medição quantitativa de rotina da melatonina no plasma. Alguns resultados sobre o ritmo circadiano da melatonina são apresentados para ilustrar a aplicabilidade deste poderoso método de cromatografia gasosa / espectrometria de massa.