Extratos de rizoma de Curcuma zedoaria Rosc induzem apoptose dependente de caspase por meio da geração de espécies reativas de oxigênio no parasita filarial Setaria digitata in vitro

A filariose linfática humana (FL) é causada principalmente pelo parasita filarial Wuchereria bancrofti e é a segunda principal causa de incapacidade permanente e de longo prazo em países tropicais. Até o momento, a incapacidade de eliminar parasitas adultos de longa vida pelos medicamentos atuais continua sendo o principal desafio na eliminação de FL. Portanto, no presente estudo, a eficácia dos extratos de rizoma de Curcuma zedoaria (uma planta tradicionalmente usada no Sri Lanka no manejo da FL) foi avaliada como um filaricida eficaz in vitro. Extratos de solvente sequencial de rizomas de C. zedoaria foram selecionados para atividade antifilarial in vitro em concentrações de 0,01-1 mg / mL por ensaio de inibição de motilidade e 3- (4, 5 dimetiltiazol-2-il) -2, 5 brometo de difenil tetrazólio (MTT) ensaio de redução usando o parasita bovino Setaria digitata como organismo modelo. A exposição de parasitas aos extratos de hexano e clorofórmio de C. zedoaria causou uma redução dependente da dose na motilidade e na viabilidade das microfilárias (IC50 = 72,42 μg / mL para o extrato de hexano, 191,14 μg / mL para o extrato de clorofórmio) e parasitas adultos (IC50 = 77,07 μg / mL para extrato de hexano, 259,87 μg / mL para extrato de clorofórmio). Ambos os extratos foram menos tóxicos para as células mononucleares do sangue periférico humano quando comparados às filarias. Um aumento dependente da dose na caspase 3 / CED 3 e uma diminuição no conteúdo de proteína total, atividades da ciclooxigenase (COX) e da proteína tirosina fosfatase (PTP) foram observados em parasitas adultos tratados com hexano ou extrato de clorofórmio. Um grau significativo de condensação da cromatina e formação de corpo apoptótico também foram observados nestes vermes por Hoechst 33342 e coloração terminal de rotulagem de extremidade de biotina e entalhe dUTP mediada por desoxinucleotidil transferase (TUNEL), respectivamente. A escada de DNA cromossômica dependente da dose foi observada em vermes adultos tratados, mas não em microfilárias em resposta a ambos os extratos. Parâmetros de estresse oxidativo, como redução nos níveis de glutationa reduzida (GSH) e aumento na transferase da glutationa (GST), superóxido dismutase (SOD) e atividades da catalase, aumento dos níveis reativos de oxigênio (ROS) e peroxidação lipídica também foram observados, indicando que um evento apoptótico é induzida por espécies reativas de oxigênio.