Efeitos inibitórios da curcumina nas células do câncer gástrico: um estudo proteômico de alvos moleculares

A curcumina, um agente anticâncer natural, demonstrou inibir o crescimento celular em várias linhas de células tumorais e modelos animais. Nós examinamos a inibição da curcumina na viabilidade celular e sua indução de apoptose usando diferentes linhas de células de câncer gástrico (BGC-823, MKN-45 e SCG-7901). O ensaio de 3- (4,5-dimetil-tiazol-2-il) -2-5-difeniltetrazólio (MTT) mostrou que a curcumina inibiu o crescimento celular em uma dose- (1, 5, 10 e 30 μM) e tempo- (24, 48, 72 e 96 h) maneira dependente; a análise da ligação da anexina V mostrou que a curcumina induziu apoptose na dose de 10 e 30 μM quando as células foram tratadas por 24 e 48 h. Como os cânceres são causados ​​pela desregulação de várias proteínas, investigamos as proteínas-alvo associadas à curcumina por eletroforese em gel bidimensional (2-DE) e espectrômetro de massa MALDI-TOF-TOF. As células BGC-823 foram tratadas com curcumina 30 μM por 24 horas e a proteína total foi extraída para o 2-DE. Na primeira dimensão do 2-DE, as amostras de proteína (800 μg) foram aplicadas a tiras de gradiente de pH imobilizado (IPG) (24 cm, pH 3-10, NL) e a focagem isoelétrica (IEF) foi realizada usando uma etapa sábia rampa de tensão; a segunda dimensão foi realizada usando 12,5% SDS-PAGE gel a 1 W de potência constante por gel. No total, 75 proteínas mostraram alterações significativas mais de 1,5 vezes nas células tratadas com curcumina em comparação com as células de controle (teste t de Student, p <0,05). Entre elas, 33 proteínas foram reguladas positivamente e 42 proteínas reguladas negativamente pela curcumina, conforme determinado por densitometria localizada. 52 proteínas com pontuação significativa de mascote foram identificadas e implicadas no desenvolvimento e progressão do câncer. Sua função biológica incluiu proliferação celular, ciclo e apoptose (20%), metabolismo (16%), processamento de ácido nucleico (15%), organização e movimento do citoesqueleto (11%), transdução de sinal (11%), dobramento de proteínas, proteólise e tradução (20%) e resposta imune (2%). Além disso, a análise de interação proteína-proteína demonstrou as redes de interação afetadas pela curcumina em células de câncer gástrico. Esses dados fornecem algumas pistas para explicar os mecanismos anticâncer da curcumina e explorar alvos moleculares mais potentes da droga que se espera sejam úteis para o desenvolvimento de novas drogas.