Determinação de melatonina e seus precursores e metabólitos usando eletroforese capilar com UV e detecção fluorométrica

Um método de cromatografia eletrocinética micelar foi desenvolvido para a determinação simultânea de melatonina e seus precursores e metabólitos. Um tampão borato 20 mM pH 9,5 com SDS 50 mM serviu como eletrólito. Triptofano, ácido 5-metoxiindolacético, 6-hidroximelatonina, melatonina, serotonina e 5-metoxitriptamina foram separados na linha de base em menos de 13 min. Os limites de detecção para detecção de UV e detecção fluorométrica com base na fluorescência nativa de analitos estavam no nível sub-ppm. O método proposto com detecção de UV foi aplicado ao controle do teor de melatonina em comprimidos farmacêuticos com precisão expressa como RSD (n = 7) = 1,6%. Para extração de amostras biológicas com clorofórmio e acetato de etila foi examinada. Com acetato de etila e clorofórmio recuperações de 87,2% e 82,1% de melatonina, respectivamente, foram obtidas a partir de amostras de plasma. A recuperação de melatonina em amostras de urina enriquecida foi de 80,0% para acetato de etila e 82,5% para clorofórmio. A detecção fluorométrica fornece uma melhora de cerca de duas vezes em relação ao UV na detecção de melatonina e pequenas melhorias para três outros analitos, mas é muito mais pobre do que o UV para triptofano e 6-hidroximelatonina em condições aplicadas.