Características de 2[125I]locais de ligação de iodomelatonina no baço de pombo e modulação da ligação por nucleotídeos de guanina

2-[125]Os locais de ligação da iodomelatonina em preparações de membrana do baço de pombo foram caracterizados. A ligação era estável, saturável, reversível e de alta afinidade. As análises de Rosenthal e Hill mostraram que a interação radioligando-receptor envolveu uma única classe de sítios de ligação. A análise dos resultados de ligação dos baços coletados durante a meia-luz revelou uma constante de dissociação de equilíbrio (Kd) de 36,6 +/- 4,8 pmol / l (média +/- sem, n = 10) e uma densidade máxima (Bmax) de 2,3 + / – 0,2 fmol / mg de proteína. Não houve diferença significativa no Kd (46,9 +/- 5,0 pmol / l) ou nos valores de Bmax (2,4 +/- 0,3 fmol / mg de proteína) para baços coletados durante o meio da escuridão (n = 9), embora o meio Os níveis de soro escuro e melatonina pineal foram significativamente maiores (P <0,05) do que os valores de luz média correspondentes. A análise cinética mostrou um Kd de 8,6 +/- 2,0 pmol / l (n +/- 4), de acordo com o derivado dos estudos de saturação. Exceto pela inibição por 2-iodomelatonina, melatonina, 6-cloromelatonina, 6-hidroximelatonina e N-acetilserotonina, os outros indóis ou neurotransmissores testados têm pouca inibição na ligação. Além disso, descobriu-se que a guanosina 5'-O- (3-tiofosfato) (GTP gama S), um análogo não hidrolisável do GTP, inibe a ligação de uma maneira dependente da dose. Estudos de saturação revelaram que isso se deve a uma diminuição tanto na afinidade quanto na densidade dos locais de ligação. Esses dados sugerem que um único tipo de receptor de melatonina é encontrado no baço de pombo e que o local é acoplado a uma proteína de ligação a nucleotídeo guinina (proteína G). Nossos resultados apóiam uma ação direta da melatonina pineal no sistema imunológico.