A curcumina reduz a expressão de Bcl-2, levando à apoptose em linhagens celulares de leucemia mieloide aguda CD34 + insensíveis à daunorrubicina e células de leucemia mieloide aguda CD34 + classificadas primárias

Fundo: A leucemia mieloide aguda (LMA) é uma doença maligna imunofenotipicamente heterogênea, na qual a positividade para CD34 está associada a um mau prognóstico. As células CD34 + AML são 10-15 vezes mais resistentes à daunorrubicina (DNR) do que as células CD34- AML. A curcumina é o principal componente da cúrcuma que mostrou atividade citotóxica em vários tipos de câncer; no entanto, sua atividade anticâncer não foi bem estudada em células AML CD34 + insensíveis a DNR. O objetivo deste estudo foi, portanto, explorar a citotoxicidade induzida pela curcumina em linhas de células de AML CD34 + insensíveis a DNR (KG1a, Kasumi-1), células de AML U937 sensíveis a DNR e células derivadas de medula óssea CD34 + primárias.

Métodos: Células CD34 + humanas primárias foram isoladas de células mononucleares de sangue periférico ou células mononucleares de medula óssea usando um kit MicroBead CD34. Os efeitos inibitórios do crescimento da curcumina foram avaliados por MTT e ensaios de formação de colônias. A distribuição do ciclo celular foi examinada pelo ensaio de iodeto de propídio (PI). A apoptose foi analisada por ensaios de coloração Wright-Giemsa, Hoechst 33342 e Anexina-V / PI. A alteração no potencial de membrana mitocondrial (MMP) foi examinada por coloração JC-1 e citometria de fluxo. A expressão de proteínas relacionadas à apoptose foi determinada por reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa e Western blotting. RNA de interferência curto (siRNA) contra Bcl-2 foi usado em células CD34 + KG1a e Kasumi-1 incubadas com / sem DNR.

Resultados: A curcumina inibiu a proliferação e induziu a apoptose e a parada G1 / S em ambas as células KG1a, Kasumi-1 e sensíveis a DNR U937, insensíveis a DNR. A apoptose induzida pela curcumina foi associada à expressão reduzida de ambos mRNA e proteína de Bcl-2, subsequente perda de MMP e ativação de caspase-3 seguida de degradação de PARP. A curcumina aumentou sinergicamente o efeito citotóxico de DNR em células KG1a e Kasumi-1 insensíveis a DNR, consistente com a expressão diminuída de Bcl-2. Consequentemente, siRNA contra Bcl-2 aumentou a suscetibilidade das células KG1a e Kasumi-1 à apoptose induzida por DNR. Mais importante ainda, a curcumina suprimiu a expressão de Bcl-2, inibiu seletivamente a proliferação e aumentou sinergicamente a citotoxicidade de DNR em células AML CD34 + primárias, enquanto mostrou letalidade limitada em progenitores hematopoiéticos CD34 + normais.

Conclusão: A curcumina regula negativamente Bcl-2 e induz apoptose em linhas de células de AML CD34 + insensíveis a DNR e células de AML CD34 + primárias.