Variação diurna na atividade fagocítica de fagócitos esplênicos em teleósteo de água doce Channa punctatus: melatonina e seu mecanismo de sinalização

O objetivo do presente estudo foi compreender as mudanças rítmicas na resposta imune inata em peixes de água doce Channa punctatus. Além disso, o papel putativo da melatonina como o zeitgeber foi explorado. A atividade fagocítica dos fagócitos esplênicos avaliados em intervalos de 6 horas mostrou maior atividade fagocítica durante a fase clara do que na fase escura. O aumento da atividade fagocítica durante a fase de luz foi diminuído pela administração de melatonina às 09:00 h. A implicação da melatonina no controle da variação diurna da atividade fagocítica foi comprovada pela administração de um inibidor irreversível de triptofano hidroxilase, para-clorofenilalanina (pCPA) às 18:00 h. O pCPA anulou a diminuição da fagocitose observada durante a fase escura, e a mesma foi restaurada após a administração de melatonina. O envolvimento direto da melatonina na modulação da fagocitose foi demonstrado após experiências in vitro. A melatonina suprimiu a atividade fagocítica de maneira dependente da concentração, sem afetar a viabilidade dos fagócitos. A existência de receptores funcionais de melatonina ligados à membrana em fagócitos de peixes foi demonstrada farmacologicamente. Luzindol, antagonista do receptor de membrana da melatonina, bloqueou completamente o efeito inibitório da melatonina na fagocitose. Outra via da adenilato ciclase-proteína quinase A (PKA) acoplada ao receptor foi implicada na transdução do efeito da melatonina, uma vez que a adenilato ciclase e o inibidor de PKA anularam completamente a supressão induzida pela melatonina. Um aumento do nível de cAMP intracelular em resposta à melatonina determinou o status do segundo mensageiro de cAMP para sinalização a jusante. No entanto, a manipulação da fosfolipase C / PKC não influenciou o efeito da melatonina na atividade fagocítica. Estas observações em C. punctatus evidenciaram a ritmicidade diurna na atividade fagocítica que é regulada pela melatonina seguindo a via de cAMP-PKA acoplada ao receptor ligado à membrana.