Superóxido dismutase purificado do rizoma de Curcuma aeruginosa Roxb. como inibidor da produção de óxido nítrico na linha celular RAW 264.7 semelhante a macrófagos

Superóxido dismutase (SOD, EC 1.15.1.1) é uma metaloenzima ou enzima antioxidante que catalisa a desproporção do radical aniônico superóxido prejudicial em peróxido de hidrogênio e oxigênio molecular. Devido aos seus efeitos antioxidantes, a SOD tem sido aplicada há muito tempo em tratamentos medicinais, cosméticos e outras indústrias químicas. Quinze plantas Zingiberaceae foram testadas quanto à atividade SOD em seus extratos de rizoma. O homogenato bruto e a fração de corte de sulfato de amônio de Curcuma aeruginosa foram encontrados para conter um nível significativo de atividade SOD. A enzima SOD foi enriquecida 16,7 vezes por precipitação sequencial de sulfato de amônio, troca iônica de dietilaminoetil celulose e cromatografia em coluna de filtração em gel Superdex 75. Foi obtido um rendimento global de SOD de 2,51% com uma atividade específica de 812,20 U / mg. O SOD enriquecido tinha um MW aparente de 31,5 kDa, conforme avaliado por eletroforese em gel de poliacrilamida de dodecil sulfato de sódio, e um pH e temperatura ótimos de 4,0 e 50 ° C. Com nitroblue tetrazolium e riboflavina como substratos, os valores de K (m) foram 57,31 ± 0,012 e 1,51 ± 0,014 M, respectivamente, com valores V (max) correspondentes de 333,7 ± 0,034 e 254,1 ± 0,022 μmol min (-1) mg de proteína ( -1). Esta SOD provavelmente pertence à categoria Fe- ou Mn-SOD devido ao fato de que era insensível à inibição do cianeto de potássio ou do peróxido de hidrogênio, mas era potencialmente fracamente estimulada por peróxido de hidrogênio e estimulada por Mn (2+) e Fe (2 +) íons. Além disso, este SOD purificado também exibiu efeitos inibitórios na produção de óxido nítrico induzida por lipopolissacarídeo em células de macrófago de camundongo cultivadas RAW 264,7 de uma maneira dependente da dose (IC (50) = 14,36 ± 0,15 μg de proteína / ml).