Melatonina

O tratamento de células doadoras suínas e embriões reconstruídos com o antioxidante melatonina aumenta a eficiência da clonagem


Este estudo foi conduzido para investigar o efeito da melatonina durante a cultura de células doadoras e embriões clonados na competência de desenvolvimento in vitro e na qualidade de embriões porcinos clonados. Em concentrações de 10 (-6) M ou 10 (-8) M, a melatonina aumentou significativamente a proliferação de fibroblastos fetais suínos (PFFs), e a taxa de blastocisto foi significativamente aumentada na célula doadora tratada com melatonina 10 (-10) M grupo. O desenvolvimento do embrião clonado também foi melhorado em meio de cultura de embrião que foi suplementado com melatonina 10 (-9) M ou 10 (-12) M. Quando as células doadoras e os embriões clonados foram tratados com melatonina, a taxa de clivagem e o número total de células de blastocistos não foram significativamente afetados; no entanto, a taxa de blastocisto aumentou significativamente (20,0% versus 11,7%). Os ensaios TUNEL mostraram que o tratamento combinado com melatonina reduziu a taxa de núcleos apoptóticos (3,6% versus 6,1%). A análise da expressão gênica dos genes BAX, BCL2L1 e p53 relacionados à apoptose mostrou que a expressão de BCL2L1 foi significativamente elevada 2,7 vezes em relação ao grupo de controle, enquanto a expressão de BAX e p53 diminuiu significativamente em 3,7 vezes e 23,2- dobrar, respectivamente. Além disso, detectamos a expressão de dois receptores de melatonina (MT1 e MT2) em PFFs, mas não em embriões clonados porcinos. Concluímos que a melatonina exógena aumenta o desenvolvimento de embriões clonados porcinos e melhora a qualidade do embrião ao inibir a via apoptótica mediada por p53. A proliferação de PFFs pode ser mediada pela ligação ao receptor, mas os efeitos benéficos da melatonina no desenvolvimento embrionário podem ser independentes do receptor, possivelmente por meio da capacidade da melatonina de eliminar diretamente os radicais livres.

Palavras-chave: apoptose; embrião; melatonina; suíno; transferência nuclear de células somáticas.



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