Ômega 3

Insights sobre a função de n-3 PUFAs em bovinos transgênicos fat-1


. Agosto de 2017; 58 (8): 1524-1535.
doi: 10.1194 / jlr.M072983. Epub 2017, 16 de junho.

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Xin-Feng Liu et al. J Lipid Res. Agosto de 2017.

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Abstrato

Os PUFAs n-3 têm muitos efeitos benéficos na saúde humana, incluindo papéis na imunidade, neurodesenvolvimento e prevenção de doenças cardiovasculares. Neste estudo, estabelecemos um modelo confiável fat-1 gado transgênico usando tecnologia transgênica e realizado uma investigação sistemática para examinar a função de n-3 PUFAs. Nossos resultados mostraram que a expressão do fat-1 gene melhorou vários parâmetros bioquímicos relacionados à função hepática e à glicose plasmática e metabolismo de lipídios plasmáticos. Os resultados da análise global do gene e da expressão de proteínas plasmáticas mostraram que 310 genes e 13 proteínas plasmáticas diferiram significativamente no sangue de fat-1 gado transgênico em comparação com gado WT, refletindo seus papéis regulatórios nos sistemas imunológico e cardiovascular. Finalmente, mudanças na microflora intestinal também foram observadas no fat-1 gado transgênico, sugerindo novos papéis para os PUFAs n-3 no metabolismo da glicose e lipídios, bem como propriedades anti-estresse. Para o melhor de nosso conhecimento, este é o primeiro relatório usando múltiplas análises paralelas para investigar a função de n-3 PUFAs usando modelos como fat-1 gado transgênico. Este estudo fornece novos insights sobre o mecanismo regulatório de fat-1 nos sistemas imunológico e cardiovascular, bem como no seu papel anti-stress.

Palavras-chave: metabolismo lipídico; ácidos graxos n-3; estresse.

Figuras

Figura 1.
Figura 1.

Identificação para o fat-1 gado transgênico. A: Detecção de fat-1 gene (450 pb) entregue em bovinos transgênicos por PCR. B: Detecção de fat-1 expressão gênica (450 pb) em bovinos transgênicos por RT-PCR. O fat-1 o vetor de expressão foi usado como o modelo para o controle positivo (P) e gado WT foi usado como o controle negativo. C: Detecção da expressão da proteína de fat-1 gene em gado transgênico por Western blot. D: Análise da composição de ácidos graxos nos tecidos de fat-1 gado transgênico. Os ácidos graxos foram medidos como ésteres metílicos por cromatografia gasosa. As barras representam a média ± DP de seis amostras de orelhas em cada grupo (seis bezerros transgênicos (FD) e seis bezerros WT de mesma idade) com duas medições independentes para cada amostra. Diferenças significativas de composição de ácidos graxos nos tecidos foram encontradas entre o gado WT e o gado transgênico (*P <0,05).

Figura 2.
Figura 2.

Análise da expressão gênica no fat-1 gado transgênico. A: O esquema representa os genes expressos diferencialmente entre fat-1 gado transgênico e gado WT. B: A análise do agrupamento hierárquico dos genes expressos em fat-1 gado transgênico e gado WT. C: Classificação do processo biológico de microarray. D: Classificação dos componentes celulares do microarray; E: Classificação da função molecular do microarray. O eixo x indica a probabilidade [−log2(P-value)] em uma categoria e o eixo y indica as diferentes subcategorias do processo biológico.

Fig. 3.
Fig. 3.

Análise de proteínas plasmáticas no fat-1 gado transgênico. A: Diagrama de Venn das três comparações (WT / FD002, WT / FD005 e WT / FD006) com base nas listas de proteínas interagentes das proteínas plasmáticas significativamente diferenciais em cada grupo. O número de proteínas interagindo é indicado nos respectivos segmentos. B: Esquema da rede de regulação para as 35 proteínas de interação comuns das proteínas plasmáticas significativamente diferenciais de três grupos (WT / FD002, WT / FD005 e WT / FD006). C – F: Análise da função de 35 proteínas de interação comuns entre os fat-1 gado transgênico e gado WT. C: Classificação do processo biológico. D: Classificação do componente celular. E: Classificação da função molecular. F: Classificação da via KEGG. O eixo x indica a probabilidade [−log2(P-value)] em uma categoria e o eixo y indica as diferentes subcategorias do processo biológico.

Fig. 4.
Fig. 4.

Análise da comunidade microbiana intestinal no fat-1 gado transgênico. A: Diagrama de Venn da comparação entre o gado WT e fat-1 gado transgênico (FD) com base nas listas OTU com 99% de similaridade. O número de OTUs é indicado nos respectivos segmentos. B: Curva de distribuição da abundância de espécies para o gado WT (WT1, WT2, WT3) e fat-1 gado transgênico (FD002, FD005, FD006). Distribuição da composição da microbiota intestinal em nível de filo para bovinos WT (C) e fat-1 gado transgênico (D). Os níveis de distribuição do gênero para Firmicutes (E), Bacteroidetes (F) e Proteobacteria (G), respectivamente. Os números 1, 2 e 3 representam os níveis de distribuição para cada vaca WT. Os números 4, 5 e 6 representam o nível de distribuição para gado transgênico FD002, FD005 e FD006. WT representa o nível de distribuição médio para três bovinos WT; FD representa o nível de distribuição médio para três fat-1 gado transgênico.

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