Identificação proteômica de proteínas expressas diferencialmente em células MCF-7 tratadas com curcumina


A curcumina (CM), um pigmento dietético bem conhecido derivado de Curcuma longa L., possui atividades anticâncer contra uma variedade de tumores, incluindo carcinoma de mama humano. Em combinação com docetaxel, o CM tem sido usado no tratamento do câncer de mama na clínica. A fim de explorar o possível mecanismo de atividade anticâncer do MC, no presente estudo, objetivamos identificar proteínas envolvidas na atividade anticâncer do MC na linhagem celular de câncer de mama humano MCF-7 usando a eletroforese bidimensional (2-DE) com base em análise proteômica. As células MCF-7 foram cultivadas a 37 ° C em uma atmosfera de 5,0% de CO (2). Todas as experiências a seguir foram repetidas três vezes. O ensaio de viabilidade celular mostrou que, após uma incubação de 48 h, CM inibiu o crescimento celular de forma dependente da dose com um valor de IC (50) de 47,42 μM. O tratamento de CM a 47,42 μM por 48 h induziu a apoptose, conforme determinado por alterações morfológicas nucleares de células coradas com Hoechst e análise de citometria de fluxo de células coradas com Anexina V-FITC / PI. A análise proteômica identificou 12 proteínas expressas diferencialmente que contribuíram para múltiplas atividades funcionais, como transcrição de DNA, splicing e tradução de mRNA, síntese de aminoácidos, síntese de proteínas, dobramento e degradação, metabolismo de lipídeos, glicólise e motilidade celular. Entre elas, 7 proteínas foram reguladas positivamente e 5 reguladas negativamente. Os regulados para cima foram verificados por PCR quantitativo em tempo real. As proteínas reguladas negativamente, TDP-43, SF2 / ASF e eIF3i, bem como aquelas reguladas positivamente, 3-PGDH, ERP29 e fator de ativação de plaquetas acetilidrolase IB subunidade beta contribuem positivamente para a atividade anticâncer de CM em MCF- 7 células. Essas moléculas estão implicadas nas bioatividades de MC pela primeira vez. As descobertas deste estudo lançariam novos insights para a compreensão sistemática dos mecanismos de MC na intervenção no câncer de mama.



Source link

Deixe um comentário

O seu endereço de e-mail não será publicado.