Efeito inibidor de Curcuma purpurascens BI. rizoma em células de câncer de cólon HT-29 através da via de apoptose mitocondrial dependente

Fundo: Curcuma purpurascens BI. (Zingiberaceae) comumente conhecido como ‘Koneng Tinggang’ e ‘Temu Tis’ é uma planta medicinal javanesa que tem sido usada para inúmeras doenças e enfermidades nas comunidades javanesas rurais. No presente estudo, a atividade apoptogênica do extrato diclorometano de Curcuma purpurascens BI. rizoma (DECPR) foi investigado contra células de câncer de cólon humano HT-29.

Métodos: O estudo de toxicidade aguda de DECPR foi realizado em ratos Sprague-Dawley. Os compostos de DECPR foram analisados ​​pela análise de cromatografia gasosa-espectrometria de massa-tempo de voo (GC-MS-TOF). O efeito citotóxico de DECPR em células HT-29 foi analisado por ensaios de MTT e lactato desidrogenase (LDH). Os efeitos do DECPR na formação de espécies reativas de oxigênio (ROS) e eventos iniciados pela mitocôndria foram investigados usando um sistema de triagem de alto conteúdo. As atividades das caspases também foram medidas por meio de um ensaio fluorométrico. A análise quantitativa de PCR foi realizada para examinar a expressão gênica das proteínas Bax, Bcl-2 e Bcl-xl.

Resultados: O estudo de toxicidade aguda in vivo de DECPR em ratos mostrou a segurança deste extrato na dose mais alta de 5 g / kg. A análise GC-MS-TOF de DECPR detectou turmerone como o principal composto no extrato de diclorometano. O valor de IC50 de DECPR para células HT-29 após 24 h de tratamento foi encontrado em 7,79 ± 0,54 μg / mL. Além disso, o DECPR induziu a liberação de LDH e geração de ROS em células HT-29 por meio de um mecanismo envolvendo fragmentação nuclear e rearranjo citoesquelético. Os eventos iniciados pela mitocôndria, incluindo o colapso do potencial de membrana mitocondrial e vazamento de citocromo C, também foram desencadeados pelo tratamento com DECPR. O iniciador caspase-9 e o executor caspase-3 foram ativados de forma dependente da dose por DECPR. A análise de PCR quantitativa na expressão de mRNA da família de proteínas Bcl-2 mostrou uma regulação positiva significativa de Bax associada à regulação negativa na expressão de mRNA de Bcl-2 e Bcl-xl.

Conclusões: As descobertas apresentadas no presente estudo mostraram que DECP suprimiu a proliferação de células cancerígenas de cólon HT-29 e desencadeou a indução de apoptose através da via mitocondrial dependente.