Determinação de melatonina em afídeos Acyrthosiphon pisum por cromatografia líquida-espectrometria de massa em tandem

A melatonina é um hormônio envolvido principalmente na regulação dos ritmos circadianos e sazonais em invertebrados e vertebrados. Apesar da identificação da melatonina em muitos insetos, seu envolvimento na resposta sazonal do inseto permanece obscuro. Um método de espectrometria de massa em tandem de cromatografia líquida (LC-MS / MS) foi desenvolvido para análise de melatonina em afídeos (Acyrthosiphon pisum) pela primeira vez. Após comparar dois procedimentos diferentes e cinco solventes de extração, um procedimento de preparação de amostra com uma mistura de metanol / água (50:50) foi selecionado para a extração de melatonina. O método foi validado pela análise da recuperação de melatonina em três concentrações incrementadas (5, 50 e 100 pg / mg) e apresentou recuperações satisfatórias (75-110%) e boa repetibilidade, expressa como desvio padrão relativo (<10%). Os limites de detecção (LOD) e quantificação (LOQ) foram de 1 pg / mg e 5 pg / mg, respectivamente. Oito níveis de concentração foram usados ​​para construir as curvas de calibração que mostraram boa linearidade entre LOQ e 200 vezes LOQ. O método validado foi aplicado com sucesso a 26 amostras de pulgões, demonstrando sua utilidade para a determinação de melatonina em insetos. Esta é, até onde sabemos, a primeira identificação de melatonina em pulgões por LC-MS / MS.