Células de câncer de cólon humano sem Bax resistem à apoptose induzida por curcumina e a exigência de Bax é dispensável com expressão ectópica de Smac ou regulação negativa de Bcl-XL

Múltiplos estímulos apoptóticos induzem alterações conformacionais em Bax, uma proteína pró-apoptótica da família Bcl-2 e sua deficiência é uma causa frequente de quimiorresistência em adenocarcinomas de cólon. A curcumina, um composto dietético da cúrcuma, é conhecida por induzir a apoptose em uma variedade de células cancerosas. Para entender o papel de Bax na apoptose induzida por curcumina, usamos células de câncer de cólon humano HCT116 com um alelo do gene Bax (Bax +/-) e células Bax knockout HCT116 (Bax – / -) nas quais o gene Bax é inativado por recombinação homóloga. A viabilidade celular diminuiu de uma maneira dependente da concentração em células Bax +/- tratadas com curcumina (0-50 microM), enquanto apenas mudanças mínimas na viabilidade foram observadas em células Bax – / – após o tratamento com curcumina. Em células Bax – / -, a ativação das caspases 9 e 3 induzida pela curcumina foi bloqueada e a da caspase 8 permaneceu inalterada. A liberação de citocromo c induzida por curcumina, ativador de caspase derivado de segunda mitocôndria (Smac) e fator de indução de apoptose (AIF) também foi bloqueado em células Bax – / – e reintrodução de Bax, regulação negativa da proteína antiapoptótica Bcl-XL por DNA antisense como bem como a superexpressão de Smac, sensibilizou altamente as células Bax – / – em relação à apoptose induzida pela curcumina. Não houve diferença considerável na porcentagem de células apoptóticas em células Bax +/- ou Bax – / – transfectadas com Bak RNAi tratadas com curcumina quando comparadas com suas células transfectadas com vetor correspondente tratadas com curcumina. O presente estudo demonstra o papel de Bax, mas não Bak como um regulador crítico da apoptose induzida por curcumina e implica o potencial de direcionamento de proteínas antiapoptóticas como Bcl-XL ou superexpressão de proteínas pró-apoptóticas como Smac como abordagens intervencionais para lidar com quimio- cânceres resistentes para terapia à base de curcumina.