Avaliação quimioluminométrica da melatonina e da interação de precursores selecionados da melatonina com espécies reativas de oxigênio e nitrogênio

A melatonina é um hormônio, derivado do triptofano, que possui uma potente capacidade de eliminação dos radicais livres mais reativos e perigosos, sendo uma importante proteção contra o estresse oxidativo. Neste trabalho, um procedimento automatizado baseado em fluxo para avaliação da capacidade de eliminação de melatonina, triptofano e 5-hidroxitriptofano foi desenvolvido. A metodologia apresentada envolveu um sistema de fluxo multibombeamento e explorou a capacidade de compostos selecionados para inibir a reação de quimioluminescência do luminol com peróxido de hidrogênio, radical hidroxila e ânion peroxinitrito. O sistema foi baseado no uso de várias microbombas atuadas por solenóide como os únicos componentes ativos do coletor de fluxo. Isso permitiu a inserção reproduzível e mistura eficiente de volumes muito baixos de amostra e reagentes, bem como o transporte da zona de amostra para a detecção para monitorar a resposta quimioluminométrica. Além disso, a alta versatilidade do sistema de fluxo multibombeamento proposto permitiu a implementação de reações distintas para a geração em linha das diferentes espécies reativas ensaiadas sem a necessidade de reconfiguração física. Os resultados obtidos demonstraram que o 5-hidroxitriptofano é o necrófago mais potente, seguido da melatonina e do triptofano. O sistema de fluxo de bombeamento múltiplo desenvolvido exibiu boa precisão de medição (desvios padrão relativos normalmente <2%, n = 10), baixo custo operacional e baixo consumo de reagente.