Avaliação in vitro da atividade antioxidante por eletroforese e cromatografia líquida de alta eficiência

Foram desenvolvidos dois métodos de análise de antioxidantes, baseados em eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE) e cromatografia líquida de alta eficiência de permeação em gel (HPLC). Ambos exploram as variações do sinal (banda ou pico) dado pela albumina sérica humana (0,2% p / v em fosfato de sódio 100 mM pH 7) após oxidação com hipoclorito (1% de uma solução contendo 4% de Cl ativo), determinado quantitativamente por análise densitométrica ou integração de pico. Com base nessas alterações, foram definidas duas fórmulas que permitiram a determinação da atividade antioxidante do ácido ascórbico (CE (50, PAGE) = 4,8×10 (-4) M, CE (50, HPLC) = 3,6×10 (-4) M ), glutationa (EC (50, PAGE) = 1,5×10 (-4) M, EC (50, HPLC) = 2,0×10 (-4) M) e melatonina (EC (50, PAGE) = 5,2×10 (-4) M, EC (50, HPLC) = 3,2×10 (-4) M), escolhidos como compostos de referência. Foi encontrada uma boa correlação entre as atividades dessas substâncias nos dois ensaios, que também estão de acordo com os dados da literatura, indicando que os dois métodos são essencialmente equivalentes. Estes ensaios podem ser úteis para o rastreio de novos fármacos antioxidantes para condições patológicas como catarata, doenças reumáticas, aterosclerose e doença de Alzheimer.