Melatonina

Anomalia autorradiográfica na ligação de 125I-melatonina revelada na adrenal ovina


Técnicas autorradiográficas convencionais in vitro têm sido usadas para rastrear uma série de tecidos periféricos ovinos quanto à presença de 2-[125I]locais de ligação da iodomelatonina. Marcação específica intensa (definida como aquela deslocada por melatonina 1 microM) foi observada no córtex adrenal e ligação específica menos intensa no baço. Tentativas subsequentes de caracterizar esses locais de ligação adrenal usando ensaios de ligação in vitro não tiveram sucesso. O nível de ligação específica às membranas brutas e às preparações de células inteiras dispersas foi desprezível e não foi correlacionado com o aumento da concentração de proteína ou célula. Usando autorradiografia quantitativa in vitro, a melatonina demonstrou inibir competitivamente 2-[125I]ligação da iodomelatonina a seções do córtex adrenal, mas com afinidade consideravelmente menor (IC50 de 1 microM) do que a obtida para a pars tuberalis ovina (IC50 de 150 pM) em condições idênticas. Esses resultados sugerem que, nas condições de autorradiografia in vitro, 2-[125I]A iodomelatonina liga-se a um número finito de locais não receptores que estão restritos à glândula adrenal ovina. A capacidade de visualizar esses locais no presente estudo pode surgir por meio do uso de um excesso inadequadamente alto de melatonina não marcada (1 microM). Consequentemente, para evitar este problema potencial, a marcação não específica talvez deva ser mais apropriadamente definida como ligação na presença de uma concentração de melatonina em aproximadamente 100 vezes o valor do Kd (isto é, 10 nM).



Source link

Deixe um comentário

O seu endereço de e-mail não será publicado. Campos obrigatórios são marcados com *