A expressão de E-FABP em células PC12 aumenta a extensão da neurite durante a diferenciação: envolvimento dos ácidos graxos n-3 e n-6

A proteína de ligação de ácido graxo epidérmico (E-FABP), um membro da família dos FABPs, exibe uma expressão robusta em neurônios durante o crescimento axonal no desenvolvimento e na regeneração do nervo após lesão do nervo. Este estudo examina o impacto da expressão de E-FABP na extensão normal da neurite na diferenciação de culturas de células de feocromocitoma (PC12) suplementadas com ácidos graxos livres de cadeia longa selecionados (LCFFA). Descobrimos que E-FABP se liga a uma ampla gama de LCFFAs saturados e insaturados, incluindo aqueles com potencial interesse para diferenciação neuronal e crescimento axonal, como ácido docosahexaenóico C22: 6n-3 (DHA), ácido eicosapentaenóico C20: 5n-3 (EPA ) e ácido araquidônico C20: 4n-6 (ARA). As células PC12 expostas ao fator de crescimento nervoso (NGFDPC12) exibem alta expressão de E-FABP que é bloqueada pelo inibidor da proteína quinase quinase ativada por mitogênio (MEK) U0126. Células de feocromocitoma diferenciadas por fator de crescimento de nervo (NGFDPC12) clones antisense (NGFDPC12-AS) que exibem baixa expressão de E-FABP têm menos neurites / mais curtos do que células transfectadas apenas com vetor ou células com sentido NGFDPC12 (NGFDPC12-S). O reabastecimento de células NGFDPC12-AS com proteína E-FABP recombinante biotinilada (biotina-E-FABP) restaura o crescimento normal de neurita. A localização celular de biotina-E-FABP em NGFDPC12 foi detectada principalmente no citoplasma e na região nuclear. O tratamento de NGFDPC12 com DHA, EPA ou ARA aumenta ainda mais o comprimento da neurita, mas não desencadeia indução adicional de fosforilação de TrkA ou MEK ou mRNA de E-FABP observado na diferenciação de células PC12 sem suplementação de LCFFA. Significativamente, os efeitos estimulantes da neurite DHA e EPA são maiores em células NGFDPC12-S do que em células NGFDPC12-AS. Estas descobertas são consistentes com o cenário de que a extensão da neurite de células PC12 em diferenciação, incluindo estimulação adicional por DHA e EPA, requer níveis celulares suficientes de E-FABP.