A curcumina atenua a lesão inflamatória aguda ao inibir a via de sinalização TLR4 / MyD88 / NF-κB em lesão cerebral traumática experimental

Fundo: O traumatismo cranioencefálico (TBI) inicia uma cascata neuroinflamatória que contribui para danos neuronais substanciais e comprometimento comportamental, e o receptor Toll-like 4 (TLR4) é um mediador importante dessa cascata. No presente estudo, testamos a hipótese de que a curcumina, um composto fitoquímico com potentes propriedades antiinflamatórias extraído do rizoma Curcuma longa, alivia a lesão inflamatória aguda mediada por TLR4 após TCE.

Métodos: A função neurológica, o conteúdo de água do cérebro e os níveis de citocinas foram testados em camundongos TLR4⁻ / ⁻ submetidos a lesão por contusão por queda de peso. Camundongos do tipo selvagem (WT) foram injetados intraperitonealmente com diferentes concentrações de curcumina ou veículo 15 minutos após TBI. 24 horas após a lesão, a ativação de microglia / macrófagos e TLR4 foi detectada por imunohistoquímica; a apoptose neuronal foi medida por coloração FJB e TUNEL; as citocinas foram testadas por ELISA; e os níveis de TLR4, MyD88 e NF-κB foram medidos por Western blotting. In vitro, um sistema de co-cultura composto por microglia e neurônios foi tratado com curcumina após estimulação de lipopolissacarídeo (LPS). A expressão e ativação morfológica do TLR4 na microglia e o dano morfológico aos neurônios foram detectados por imunohistoquímica 24 horas após a estimulação.

Resultados: A expressão da proteína de TLR4 no tecido pericontusional atingiu um máximo em 24 horas pós-TCE. Em comparação com os camundongos WT, os camundongos TLR4⁻ / ⁻ mostraram comprometimento funcional atenuado, edema cerebral e liberação de citocinas pós-TBI. Além da melhora nos aspectos acima, o tratamento com 100 mg / kg de curcumina pós-TBI reduziu significativamente o número de microglia / macrófagos positivos para TLR4, bem como liberação de mediador inflamatório e apoptose neuronal em camundongos WT. Além disso, a análise de Western blot indicou que os níveis de TLR4 e seus efetores a jusante conhecidos (MyD88 e NF-κB) também diminuíram após o tratamento com curcumina. Resultados semelhantes foram observados na microglia e co-cultura de neurônios após tratamento com curcumina após estimulação com LPS. O LPS aumentou a imunorreatividade de TLR4 e a ativação morfológica na microglia e aumentou a apoptose neuronal, enquanto a curcumina normalizou essa regulação positiva. Os níveis elevados de proteína de TLR4, MyD88 e NF-κB na microglia foram atenuados pelo tratamento com curcumina.

Conclusões: Nossos resultados sugerem que a administração de curcumina pós-lesão pode melhorar o resultado do paciente, reduzindo a ativação aguda de microglia / macrófagos e apoptose neuronal por meio de um mecanismo que envolve a via de sinalização TLR4 / MyD88 / NF-κB em microglia / macrófagos em TBI.